RECQL4 potencia la progresión del cáncer cervical a través de la vía PI3K/AKT

El cáncer cervical es uno de los principales cánceres ginecológicos, con más de 600,000 casos anuales en el mundo y una alta mortalidad asociada. Este tipo de cáncer está estrechamente relacionado con la inestabilidad genómica causada por daño en el ADN, muchas veces inducido por infecciones persistentes del virus del papiloma humano (VPH). RECQL4, una helicasa de la familia RecQ, es fundamental para la reparación del ADN y la estabilidad genómica. Si bien se ha implicado a RECQL4 en la progresión de varios tipos de cáncer, su función específica en el cáncer cervical no había sido explorada previamente. Este estudio investigó cómo RECQL4 influye en la progresión tumoral mediante ensayos funcionales in vitro e in vivo, y exploró su papel en la activación de la vía PI3K/AKT.

Materiales y métodos

Para llevar a cabo el estudio, los investigadores analizaron datos de expresión genética y clínica obtenidos de bases de datos públicas como The Cancer Genome Atlas (TCGA) y GEO. Esto incluyó el análisis de 306 muestras tumorales y 3 normales de tejido cervical, así como el uso de cohortes independientes (GSE9750 y GSE39001) para validar los hallazgos.

Se utilizaron líneas celulares de cáncer cervical (SiHa y CaSki) para experimentar con la supresión y sobreexpresión de RECQL4 mediante vectores lentivirales y plasmídicos. Las células manipuladas fueron sometidas a ensayos de proliferación celular (CCK-8 y formación de colonias), análisis del ciclo celular y apoptosis (mediante citometría de flujo), y ensayos de migración e invasión (cicatrización y Transwell).

En un modelo animal, ratones Nod-SCID fueron inyectados subcutáneamente con células tumorales con expresión reducida de RECQL4 para evaluar el impacto en el crecimiento tumoral in vivo. Los tumores extraídos fueron analizados mediante inmunohistoquímica y ensayos TUNEL para identificar cambios en marcadores proliferativos, apoptóticos y relacionados con la transición epitelio-mesénquima (EMT).

Adicionalmente, se realizaron análisis bioinformáticos mediante RNA-seq para identificar genes diferencialmente expresados tras la supresión de RECQL4 y se llevaron a cabo análisis de enriquecimiento funcional (GSEA y KEGG) para identificar las vías moleculares involucradas.

Resultados:

El estudio encontró que RECQL4 está significativamente sobreexpresado en tejidos tumorales cervicales en comparación con tejidos normales. Además, esta sobreexpresión se correlaciona con un peor pronóstico y una menor supervivencia global, según los análisis de Kaplan-Meier.

En experimentos funcionales, la sobreexpresión de RECQL4 aumentó significativamente la proliferación celular, el marcador Ki-67 y la capacidad de replicación del ADN en las líneas celulares SiHa y CaSki. Por otro lado, la supresión de RECQL4 redujo estas capacidades de manera significativa y provocó un arresto en la fase G1/S del ciclo celular. Este efecto fue acompañado por un aumento en las proteínas reguladoras del ciclo celular p21 y p27, así como por un incremento en los niveles de apoptosis, medidos mediante citometría de flujo y marcadores como caspasa-3.

RECQL4 también mostró un papel crucial en la migración e invasión celular a través de la regulación de la transición epitelio-mesénquima (EMT). La sobreexpresión de RECQL4 aumentó los niveles de proteínas asociadas con EMT, como N-cadherina y β-catenina nuclear, mientras que disminuyó la expresión de E-cadherina, un marcador epitelial. La supresión de RECQL4 revirtió estos efectos, limitando la capacidad de migración e invasión de las células tumorales.

En términos mecanísticos, los análisis de RNA-seq revelaron que RECQL4 activa la vía PI3K/AKT. Los experimentos confirmaron que la supresión de RECQL4 reduce los niveles de proteínas fosforiladas de AKT y GSK3β, elementos clave en esta vía. Además, el uso del inhibidor de AKT (MK2206) contrarrestó los efectos oncogénicos de RECQL4, reduciendo la proliferación, la EMT y la migración celular.

En el modelo in vivo, los ratones inyectados con células tumorales con supresión de RECQL4 mostraron una reducción significativa en el tamaño y peso de los tumores, así como un aumento en los marcadores apoptóticos y en la expresión de E-cadherina, confirmando los resultados obtenidos in vitro.

El estudio demuestra que RECQL4 actúa como un importante factor oncogénico en el cáncer cervical, promoviendo la proliferación, migración e invasión celular a través de la activación de la vía PI3K/AKT. La inhibición de esta vía contrarresta los efectos malignos de RECQL4, posicionándola como un prometedor objetivo terapéutico en el tratamiento del cáncer cervical. Estos hallazgos sugieren la necesidad de estudios adicionales para validar su potencial clínico y explorar su aplicación en terapias dirigidas.

Del artículo original, tomada con fines educativos e informativos. Sobreexpresión de RECQL4 en las células.